《非洲猪瘟病毒P54蛋白原核载体的构建及ELISA试剂盒的制备》课题的研制成功，打破了国际上的技术垄断，降低了国内相关企业非洲猪瘟的检测成本，为生产企业创造了利润。
该项目经天津晨星生物工程有限公司使用一年，效果良好，当年利用此课题方法实现利润80万元人民币，该技术为保证我国养猪业及畜牧业的健康发展提供了有力的技术支撑。
今年3月，国家质检总局对天津检验检疫局承担的总局科技计划项目《非洲猪瘟病毒P54蛋白原核载体的构建及ELISA试剂盒的制备》课题进行鉴定。鉴定委员会听取了课题组所作的工作报告，审阅了技术报告，专家一致认为：该课题通过体外表达非洲猪瘟p54抗原并制备单克隆抗体，建立了非洲猪瘟竞争性ELISA检测方法并研制出相应的诊断试剂盒，灵敏度高、操作性强，便于推广使用，整体研究成果达到了同类研究的国际先进水平。
立 项
我国是一个没有非洲猪瘟传播的国家。世界上许多先进国家都已建立了非洲猪瘟病毒（ASFV）的诊断方法并且已经应用于日常出入境检验检疫及猪只运输的检验工作中。基于非洲猪瘟病毒的高传播性、高致死率和难以根除等特性，由于ASFV病毒不产生中和抗体，所以没有有效的疫苗，这就使该病的控制和根除完全依赖于快速、准确的实验室诊断技术，以及基于诊断技术的兽医卫生执法措施。另外，非洲猪瘟的临床症状及病理变化与猪的其他出血性疾病，特别是古典猪瘟非常相似，因此建立不同的、能够区别于猪的其他疾病的ASFV诊断方法是非常必要和紧迫的。
为防止非洲猪瘟（ASF）传入我国，天津检验检疫局动物检疫实验室立足农业生产安全，着眼尽快建立敏感特异的诊断方法并应用于日常进口检验工作中，从2006年开始，天津检验检疫局动物检疫实验室的专家们就开始了此方面的研究。在国内禁止引进外来病毒，无法建立此病的血清学检测技术的情况下，利用重组非洲猪瘟病毒抗原，建立快速、安全的诊断和检疫方法，以进行技术储备是十分必要的。
攻 坚
该研究主要是建立包括ELISA方法和实时荧光定量PCR方法在内的非洲猪瘟快速检测技术研究，以直接应用于口岸对进境猪及其相关制品的诊断和检疫技术，为无非洲猪瘟（ASF）国家的进口检疫工作提供可靠、有效的技术条件。攻克的难题主要包括两方面：一是利用分子生物学技术制备非洲猪瘟P30、P54特异性抗原，最终形成便于推广应用的非洲猪瘟ELISA诊断试剂盒；二是针对非洲猪瘟主要抗原P54基因序列，设计特异性引物和TaqMan探针，并绘制标准曲线，建立ASFV的荧光定量PCR方法并制备相应的检测试剂盒。
经过几年的研究，两种试剂盒研制成功，该项目研发的非洲猪瘟检测试剂盒，通过OIE非洲猪瘟参考实验室（西班牙动物疾病研究所）选取的34头份实验室感染病毒猪血清和27头份野毒株猪血清样品进行验证，结果表明，特异性达到89%，灵敏度达到81%，结果数据达到了检测标准，灵敏度和特异性均达到要求。
成 果
该项目课题承担完成了“十一五”国家科技支撑计划子课题《非洲猪瘟快速检测技术研究》，构建了“非洲猪瘟（ASF）病毒P54蛋白原核载体”并建立包括ELISA方法和实时荧光定量PCR方法在内的“非洲猪瘟快速检测试剂盒”，参加了国家质检总局组织的科技成果展。项目专家参加了国家质检总局、工业和信息化部、公安部、交通运输部、铁道部、农业部、海关总署、林业局等国家八部委联合组织的非洲猪瘟防范工作会议，作为专家对边贸地区的相关人员进行了非洲猪瘟检测技术讲座。通过研究，共申请发明专利5项，在核心期刊上发表论文5篇，在2011年天津市科技进步奖评选中，《非洲猪瘟快速检测技术研究》获得科技进步三等奖。
