饲料粗纤维含量的测定方法

　　饲料-粗纤维含量的测定-重量法

　　一 范围

　　本方法规定了饲料中粗纤维含量的测定。

　　本方法适用于各种混合饲料、配合饲料、浓缩饲料及单一饲料。

　　二 引用标准

　　GB/T601 化学试剂滴定分析用标准溶液的制备

　　三 原理

　　用浓度准确的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醇除去可溶物，经高温灼烧扣除矿物质的量， 所余量为粗纤维。它不是一个确切的化学实体，只是在公认强制规定的条件下测出的概略成分，其中以纤维素为主，还有少量半纤维素和木质素。

　　四 试剂

　　分析中，除另有说明外，仅使用分析纯的试剂和蒸馏水或与其纯度相当的水。

　　4.1 硫酸溶液，0.128 0.005mol/L

　　4.1.1 配制

　　量取7.68mL 硫酸，缓缓注入1000mL，冷却，摇匀。

　　4.1.2 标定

　　4.1.2.1 测定方法

　　称取0.5g270 ～300℃灼烧至恒重的基准无水碳酸钠，称准至0.0001g。溶于50mL 水中，加10 滴甲酚绿-甲基红混合指示液，用配制好的硫酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时作空白试验。

　　4.1.2.2 计算

　　硫酸溶液浓度按下式计算：

　　C（1/2H2SO4）=m/（V1-V2）0.05299

　　式中：

　　c --硫酸溶液的物质的量浓度，mol/L;

　　m--无水碳酸钠的质量，g;

　　V1--硫酸溶液的用量，mL;

　　V2--空白试验硫酸溶液的用量，mL;

　　0.05299--与1.00mL 硫酸溶液[C（1/2H2SO4） =1.000mol/L]相当的以克表示的无水碳酸钠的质量。

　　4.2 氢氧化钠溶液，0.313 0.005mol/L

　　4.2.1 配制

　　称取约12.5g 氢氧化钠，注入1000mL 无水二氧化碳的水中，摇匀。

　　4.2.2 标定

　　4.2.2.1 测定方法

　　称取1.8g105～110℃灼烧至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾，称准至0.0001g。溶于80mL 水中，加2 滴10g/L 酚酞指示液，用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，同时作空白试验。

　　4.2.2.2 计算

　　氢氧化钠溶液浓度按下式计算：

　　C（NaOH）=m/（V1-V2）0.2042

　　式中：c--氢氧化钠溶液的物质的量浓度，mol/L;

　　m--邻苯二甲酸氢钾的用量，g;

　　V1--氢氧化钠溶液的用量，mL;

　　V2--空白试验氢氧化钠溶液的用量，mL;

　　0.2042--与1.00mL 氢氧化钠溶液[C（NaOH）=1.000mol/L]相当的以克表示的邻苯二甲酸氢钾的质量。

　　4.3 酸洗石棉

　　4.4 95%乙醇

　　4.5 乙醚

　　4.6 正辛醇（防泡剂）

　　五 仪器设备

　　5.1 实验室用样品粉碎机。

　　5.2 分样筛，孔径1mm（18 目）。

　　5.3 分析天平，感量。0.0001g。

　　5.4 电加热器（电炉）可调节温度。

　　5.5 电热恒温箱（烘箱），可控制温度在130℃。

　　5.6 高温炉，有高温计可控制温度在500～600℃。

　　5.7 消煮器，有冷凝球的600mL 高型烧杯或有冷凝管的锥形瓶。

　　5.8 抽滤装置，抽真空装置，吸滤瓶和漏斗。（滤器使用0.071mm（200 目）不锈钢网或尼龙滤布）。

　　5.9 古氏坩埚，30mL，预先加入酸洗石棉悬浮液30mL（内含酸洗石棉0.2～0.3g）再抽干，以石棉厚度均匀， 不透光为宜。上下铺两层玻璃纤维有助于过滤。

　　5.10 干燥器，以氯化钙或变色硅胶为干燥剂。

　　5.11 粗纤维测定仪器

　　国内外生产的符合本标准测定原理，且测定结果一致的仪器。

　　六 试样制备

　　将样品用四分法缩减至200g，粉碎，全部通过1mm（18 目）筛，放入密封容器。

　　七 操作步骤

　　7.1 仲裁法

　　称取1～2g 试料，精确至0.0002g，用乙醚脱脂，（含脂肪大于10%必须脱脂，含脂肪不大于10%，可不脱脂），放入消煮器，加200mL 已沸腾的硫酸溶液（0.128 0.005mol/L）和1 滴正辛醇，立即加热，应使其在2min 内沸腾，调整加热器，使溶液保持微沸，且连续微沸30min，注意保持硫酸浓度不变。试样不应离开溶液沾到瓶壁上。随后抽滤，残渣用沸蒸馏水洗至中性后抽干。用已沸腾的氢氧化钠溶液（0.313  0.005mol/L）将残渣转移至原容器中并加至200mL，同样准确微沸30min，立即在铺有石棉的古氏坩埚上过滤，先用25mL 硫酸溶液（0.128 0.005mol/L）洗涤，残渣无损失地转移至坩埚中，用沸蒸馏水洗至中性，再用15mL 乙醇洗涤，抽干。将坩埚放入烘箱，于130 2℃下烘干2h，取出后在干燥器中冷却至室温，称量，再于550 25℃高温炉中灼烧30min，取出后于干燥器中冷却至室温后称量。

　　7.2 推荐法称1～2g 试料（脱脂步骤同手工方法）于G2 玻璃沙漏斗中，用坩埚夹将漏斗插入热萃取器；从顶部加入200mL 预先煮沸的硫酸溶液（0.128 0.005mol/L）和两滴正辛醇，将加热旋扭开到最大位置，待溶液沸腾后，将旋扭调到合适位置，使溶液保持微沸30min，抽滤，用沸蒸馏水洗至中性，加入200mL 预先煮沸的氢氧化钠溶液（0.313 0.005mol/L），同样准确微沸30min，抽滤，用沸蒸馏水洗至中性，将坩埚转移至冷萃取器，加入25mL95%乙醇，抽干，将漏斗转移至烘箱，于130 2℃下烘干2h，取出后在干燥器中冷却至室温，称量。再放入500 25℃高温炉中灼烧1h，干燥器中冷却至室温后称量。型号不同的仪器具体操作步骤见该仪器使用说明书。

　　八 结果计算

　　按下式计算粗纤维的质量分数：

　　粗纤维（%）=m1-m2/m

　　式中： m1──130℃烘干后坩埚及试样残渣量，g;

　　m2──550℃（或500℃）灼烧后坩埚及试样残渣量，g;

　　m──试样（未脱脂）质量，g。

　　9 精密度

　　每个试样取两平行样进行测定，以其算术平均值为结果。

　　粗纤维含量在10%以下，绝对值相差0.4。

　　粗纤维含量在10%以上，相对偏差为4%。

　　10 参考文献

　　GB/T 6434-94 饲料中粗纤维测定方法