畜产品中瘦肉精快速检测技术

  瘦肉精，又名克喘素、氨哮素等，是β一肾上腺素激动剂(简称β一兴奋剂)的一种，有增加心率、心血输出量、心缩压，提高骨骼肌、冠状动脉和肝脏等局部血流量的作用，临床上主要作为支气管解痉药物，用于治疗哮喘。人们偶然发现它具有促进畜禽脂肪分解、增加肌肉生长作用，便作为营养重分配剂开始应用于饲料生产中。但随之而来的问题是人食用了饲喂克伦特罗的动物所生产的畜产品后，残留的克伦特罗会引起中毒，出现肌肉震颤、心悸、肌肉疼痛、晕眩、呕吐、发抖等症状，大面积的中毒事件在世界范围内时有发生。因此，许多国家禁止在饲料中使用克伦特罗，我国政府已明文规定在畜牧生产中严禁使用克伦特罗等β一兴奋剂。因此，对农畜产品中瘦肉精残留的检测是目前我国药物残留检测的一项重要工作。
    一、传统的检测方法——仪器法
     测定饲料中的克伦特罗的方法有高效液相色谱一一质谱联用法(HPLC-MS)、气相色谱一一质谱联用法(GC-MS)、高效波相色谱法(HPLC)，这些都是比较传统的办法，日前仍作为确认方法，该方法是利用仪器设备对瘦肉精进行定量定性检测。农业部2001年颁布的强制性行业标准一一饲料中盐酸克伦特罗测定(Ny-438)包括GC-MS和 HPLC两种方法。该方法准确，精度可达到0．5UG／KG，需要昂贵的仪器设备作为基本条件而且操作繁杂、耗时较长，仅限于少数的大型检测机构使用，也作为仲裁方法。
    二、快速检测方法一～试剂盒和试纸法
    目前常用的是酶联免疫法(ELISA)，其原理是利用免疫学抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用，通过化学方法将植物辣根过氧化物酶(HRP)与克伦特罗(cL)结合，形成酶偶联克伦特罗。将固相载体上已包被的抗体(羊抗兔Lgc抗体)与特异性的抗克伦特罗抗体结合，然后加入待测克伦特罗和酶偶联克伦特罗，它们竞争性与克伦特罗抗体结合，洗涤后加底物，根据有色物的变化计量待测克伦特罗量。若待测克伦特罗多，则被结合的酶偶联克伦特罗少，有色物量就少。用目测法或比色法测定样品中的克伦特罗含量，比色的最佳波长为450 nm，参比波长应大于600nm。
    1试剂盒法
    该方法是利用ELISA的基本原理，将抗原与抗体的特异性免疫反应在微量孔中进行，在特定的实验程序反应后，用眼睛或酶标仪在特定波长下对测定反应液的吸光度，再绘制标准样品的标准曲线，从而推算样品的待测样品的浓度，达到测定瘦肉精的目的。
     该方法在农畜产品的检测应用已有几年的历史，和传统的仪器相比，检测时间大大缩短，一般只需要几I一分钟的时间，只需要简单的仪器设备，目前是生产实践中初筛的主要方法，也已被广大的检验工作者所接受。目前在市场上应用的产品主要来自进口，以德国拜发公司为代表，灵敏度可达到001PPB；近两年国内科技工作者也在努力开展此方面的工作，以大连普瑞康为代表的国产产品正被人们认识和接受。
    2试纸条法
    也是利用免疫学原理，结合先进的胶体金技术，使特异性的抗原抗体反应在试纸上进行。产品在试纸条的“中央判读区”喷有两条隐形的线，上面一条为对照线，下面一条为测试线。操作的时候将试纸条插入经处理的样品液中，反应几分钟，则可以根据两条线颜色的深浅不同而判定检测结果。目前这种技术还不多见，以大连普瑞康产品为代表，灵敏度可达到2个PPB，一投放市场，以其方便、快速和容易操作等特点越来越受到人们的关注。
    三、不同检测方法的优势比较
    传统的仪器法以其准确为特点至今仍作为仲裁和确认的方法。但是中国检测机构的条件千差万别，农业检测机构更是如此，能具备该条件的实验室少之又少，而且检测成本很高。而我国检测瘦肉精的检测点大多数分布在基层，因此限制了该方法的推广。
     试剂盒法通过几年的推广已经被人们所接受，也节约了大量的人力物力，不需要大量的设备投入，作为初筛法正越来越普遍的使用，但该方法仍需要基础的试验设备、熟练的技术人员操作、场地限制，使许多执法部门无法使用，在许多企业的推广也受到了限制。尽管时间很短，但在产品投入市场的环节还显得非常缓慢，和物流速度不相匹配。
    试纸条法方便简洁，不需要基本的仪器和熟练的技术要求，不受场地的限制，灵敏度也可满足市场的使用要求，是企业、基层检测机构和市场理想的选择。但其不能定量，只能做为初筛的方法，限制了它在一些检测机构的使用。
    四、检测技术发展的展望
    就目前我国瘦肉精检测工作，从上到下都极为重视，但是由于技术条件的限制，检测的力度和广度都远未达到要求，瘦肉精等违禁药物污染的产品在市场仍不鲜见。为确保该项：工作的顺利进行，检测工作应朝以下方面发展。
    1．前处理更简单
    我国的检测条件和发达国家相比差距很大，农业行业尤其如此，大面积推广快速检测产品在农畜产品的生产中更为重要。目前检测技术的要求都需要繁杂的前处理，影响了产品检测的速度。今后的工作应摸索和探讨更为简便的样品前处理方法，完善产品的快速检测。
    2．定性定量结合起来
    有些产品如检测试纸检测速度很快精度也可达到生产的需求，但不能准确的定量。在以后的工作中，加大试纸的定性研究，将定性和定量结合起来，使检测更准确更快捷。
    3．加快国产化的步伐
     目前检测成本也是制约检测产品推广的主要因素。过去的时间里，市场使用的主要是来自进口的产品，～度价格昂贵，目前虽然有所降低，但与市场的要求还有很大的距离。引进先进技术，加大国产化的力度，在保证基本质量的前提下，降低成本是国内检测工作者的需求，也是检测工作者努力的目标。