关键词 硒；锗；维生素E；肉仔鸡；生产性能；抗应激力
集约化生产条件下，应激是生产中不可避免的，也是严重影响家畜（禽）生产性能和肉产品质量的因素。近年来，对肉鸡生产中的应激不断进行了研究，一些矿物质元素如硒、锗，一些维生素如VC、VE等被认为可减少应激的发生，本试验联合添加VE、硒和锗，研究三者在减轻应激方面有无协同作用，并确定合适的添加量，为生产实际提供指导意义。
1 材料与方法
1.1 试验材料及试验动物
二氧化锗(GeO2),光谱纯，由北京晶辉红外光学科技有限公司提供，纯度99.999 9%，含锗量为69.4%；亚硒酸钠(Na2SeO3·5H2O)，分析纯, 沈阳市制剂二厂生产, 纯度97%,含硒量为28.1%；维生素E（VE），纯度50%,瑞士罗氏（Roche）公司生产的dl-α生育酚醋酸酯。试验动物由辽宁沈阳辉山种鸡场提供的288只1日龄艾维茵肉仔鸡。
1.2 试验时间与地点
饲养试验从2005年3月到5月初在沈阳农业大学畜牧兽医学院肉仔鸡代谢、饲养实验室进行，实验测定在饲料分析实验室及生化实验室完成。
1.3 试验设计
试验采用2×2×3三因子析因化设计，将选用的一日龄288只艾维茵肉仔鸡随机分为12组，每组3个重复，每个重复8只鸡，试验设计见表1。
1.4 试验基础日粮营养水平
基础日粮为玉米-豆粕型粉状料，参照NRC(1994)第九版肉仔鸡营养标准(呙于明，1997)和中国饲料营养成分表(王忠贵，1996)自行配制而成。试验分0～3周龄和4～7周龄两阶段进行，具体日粮配方和营养水平见表2。
1.5 药物添加方法
分别精称不同剂量的Na2SeO3、GeO2粉和VE，先混匀加入少量基础日粮作为稀释剂，然后逐级放大，混匀于基础日粮中。
1.6 应激方法
本试验采用高密度应激法和热应激法结合，分两次进行，第一次为3周龄末，第二次为7周龄末。第一次密度应激从20日龄早8：00持续到21日龄早8：00，第二次密度应激从41日龄早8：00持续到42日龄早8：00。每次鸡只数都由12只增加到24只，采取红外线灯光照4h，温度控制在（35±2）℃，应激期间自由采食、饮水。
2 检测指标
2.1 生产性能的测定
分别在3周龄末和7周龄末称量各阶段各试验组的剩余饲料量，并且同时于清晨鸡空腹时称量各试验组鸡体重，计算耗料量、料重比和增重。
2.2 血液生化指标测定
血清中肌酸激酶活性的测定，采用肌酸激酶活力测试盒测定（由南京建成生物工程研究所生产）；血清中乳酸脱氢酶活性的测定，采用乳酸脱氢酶活力测试盒测定（由南京建成生物工程研究所生产）；血清中皮质醇活性的测定采用放射免疫测定盒测定（由北京北方生物技术研究所提供），在中国医科大学实验室测定完成。
2.3 数据的统计分析
试验所得数据用SPSS11.5统计分析软件进行方差分析；多重比较用邓肯氏法（Duncans）。
3 结果与分析
3.1 生长性能
整个试验期间各处理组对肉仔鸡增重、料重比的影响见表3。
从表3中显示的数据可以看出，0～3周龄和4～7周龄时，日粮中各硒水平间对肉仔鸡增重、料重比均无显著影响(P>0.05)，而且日粮中分别添加0.15mg/kg和0.3mg/kg的硒对肉仔鸡的增重和料重比的影响差异不显著(P>0.05)。这说明日粮中0.15mg/kg的硒能满足肉仔鸡生长性能的需要。从整个试验期来看，硒的最适添加量为0.15mg/kg。
日粮中锗水平对肉仔鸡0～3、4～7两个阶段的增重、料重比均无显著影响(P>0.05)，随日粮锗水平的增加，增重、料重比无明显变化，这说明在整个试验期间5mg/kg的锗已满足肉仔鸡生长性能的需要，提高剂量无明显改善肉仔鸡生长性能的效果。另外，硒与锗的互作在增重和料重比方面却表现出了明显的互作效应(P<0.05)。综合以上结果说明，硒、锗的最适添加量分别为0.15mg/kg和5mg/kg。
从表中显示的数据可以看出，日粮中添加不同的维生素E水平对肉仔鸡0～3、4～7两个阶段的增重有显著的影响(P<0.05)。而日粮中分别添加100mg/kg和150mg/kg的维生素E对肉仔鸡增重影响不显著(P>0.05)，这说明在整个试验期间，100mg/kg的维生素E已满足肉仔鸡生长性能的需要，提高剂量无明显改善肉仔鸡生长性能的效果。从料重比数据可以看出，日粮中分别添加50、100、150mg/kg的维生素E对肉仔鸡0～3、4～7两个阶段的料肉比无显著影响(P>0.05)。综合上述结果可知，维生素E的最适添加量为100mg/kg。
3.2 日粮添加硒、锗、维生素E对肉仔鸡血清中酶活的影响
3.2.1 日粮中添加硒、锗、维生素E对乳酸脱氢酶(LDH)活力的影响（见表4）
LDH是糖酵解过程中的关键酶，血清中该酶的活性升高与无氧酵解加强密切相关。在应激过程中LDH活性明显升高，揭示在应激的状态下出现呼吸功能障碍，造成乏氧性缺氧，机体内能量代谢的无氧酵解过程加强。这与Teeter(1987)、刘铀(1999)等研究结果一致。本试验结果显示：日粮中添加不同水平硒使各组酶活水平显著下降，硒各水平间差异显著(P<0.05)；日粮中添加不同水平的锗对LDH活性无显著的影响(P>0.05)；在整个试验过程中，日粮联合添加硒、锗使酶活性显著下降，这说明硒、锗之间在LDH活性方面存在着明显的协同效应（P<0.05），而这3种物质之间的其余互作效应均不显著（P>0.05）；日粮中添加不同水平的维生素E对LDH活性有极显著的影响(P<0.01)，使酶活水平极显著下降。
3.2.2 日粮中添加硒、锗、维生素E对肌酸激酶(CK)活力的影响（见表5）
CK在骨骼肌中含量最高，其功能是为骨骼肌的运动提供能量。在应激状态下，采食量减少，糖元合成不足，肌肉能量供应不足，而导致营养不良，因此，肌肉中CK从细胞中逸出入血液，使血清中CK急剧升高。这与刘春燕(2000)、Malcolm AM(1995)的试验结果相一致。本试验结果显示：日粮中添加不同水平硒使各组酶活水平显著下降，硒各水平间差异极显著(P<0.01)；锗的不同添加水平对CK活性无显著的影响(P>0.05)；在整个试验过程中，日粮联合添加硒、锗使酶活性下降，硒、锗之间的互作对CK活性的影响显著(P<0.05)，而其余的互作效应均不显著（P>0.05）；日粮中添加不同水平维生素E对CK活性有极显著的影响(P<0.01)，使酶活水平极显著下降。
3.2.3 日粮添加硒、锗、维生素E对皮质醇活力的影响（见表6）
皮质醇也叫作应激激素，产生于肾上腺中。应激可导致皮质醇分泌急剧增加，这与顾宪红等在蛋鸡上的结果相似。本试验结果显示：日粮中添加不同水平硒使各组酶活水平都显著下降，硒水平间差异显著(P<0.05)；锗的不同添加水平对皮质醇活性无显著的影响(P>0.05)；日粮中添加不同水平维生素E皮质醇活性有显著的影响P<0.05)；在整个试验过程中，3种物质之间的互作效应均不显著(P>0.05)。
4 讨论
4.1 硒、锗、维生素E联合添加对肉仔鸡生长性能的影响
应激状态下，鸡采食中枢兴奋性部分受到抑制，使采食量和物质代谢活动降低。其主要表现为：食欲下降、采食量减少、生长速度降低、对疾病抵抗力减弱，从而影响生长性能，严重时出现死亡。锗能有效提高肝脑等脏器超氧化物歧化酶(SOD)的活性，保护机体不受自由基反应损伤；硒是谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）的必要组成部分；维生素E调节糖皮质激素和甲状腺激素的分泌，从而维持了肉仔鸡体内的蛋白质代谢。试验结果表明，维生素E对肉仔鸡的增重方面影响显著。整个试验过程中，虽然硒、锗两元素单独分析对肉仔鸡的生长性能影响差异不显著，但硒与锗联合互作在生长性能方面却表现出了明显的协同效应，并且可以用锗来代替一部分的硒以降低硒的毒性并能获得显著的效果；而3种物质联合添加对生长性能的影响却不显著。许多研究表明，关于肉仔鸡硒（亚硒酸钠形式）的需要量各国推荐标准比较一致，均为0.3mg/kg，且各阶段无差异；关于肉仔鸡锗（二氧化锗形式）的需要量为10mg/kg；关于肉仔鸡维生素E的需要量研究结果不一。本试验经统计软件分析得出的数据显示，硒和锗联合添加量分别为0.15mg/kg和5mg/kg时，对肉仔鸡生长性能影响显著(郝正里等，1997)。维生素E的添加量为100mg/kg可明显改善肉对正常细胞代谢的干扰。皮质醇也叫作“应激激素”，产生于肾上腺中。应激可导致皮质醇分泌急剧增加，随着高温时间延长其浓度下降。当机体进入应激状态时，机体代谢加强，产热增多，此时皮质醇含量增加。随后，由于动物处于应激状态时间较长，肾上腺皮质功能衰竭，皮质醇的分泌减少，随着机体对应激的适应，血清中皮质醇的含量又有所升高，但不能达到正常水平。日粮添加硒、锗、维生素E可以缓解血清中因应激而造成皮质醇分泌增加。
5 结论
肉仔鸡日粮中联合添加硒、锗、维生素E可降低因高密度和热应激引起的乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性上升和皮质醇分泌增加，可提高肉仔鸡的抗应激力。通过对提高肉仔鸡的生长性能和抗应激能力方面的研究，肉仔鸡日粮中联合添加硒和锗效果明显，而3种物质联合添加效果不显著。建议在日粮中联合添加硒和锗，添加量分别为0.15mg/kg和10mg/kg。
