1 杯碟法——测定最大抑菌圈直径
本法采用杯碟中加入一定剂量防霉剂液，在琼脂平板上扩散，根据抑菌圈直径大小来定量测定其防霉效果。方法是将一定规格的不锈钢牛津杯（1.0× 1.0cm、0.8×1.0cm），轻轻垂直置于上层带定量规定试验菌琼脂平板上，杯中加入一定剂量的被测防霉剂配制液，小心平置于培养箱（28±1℃）中培养2～3d，在菌体生长的同时，防霉剂液均匀扩散到琼脂平板上，抑制杯周围的菌孢子生长，从而产生不长菌的透明抑菌圈，抑菌圈直径越大，则表明抑菌效果越显著。操作过程中，供试菌悬液菌数应控制在106～107个/mL之间，防霉剂剂量0.8%～1.6%之间。
常见的防霉剂，绝大多数是有机酸、有机酸盐、有机酸酯等或多种成分的复配型粉剂，经常水、油溶共存，因此在配制溶剂时，必须选配一种理想的溶剂，此溶剂既可将防霉剂水、油溶有效成分从载体上完全溶解下来，又在试验中对受试菌没有抑制作用。
此法的特点，是它能定量比较防霉剂的抑菌效果，速度快，结果准确，但操作复杂，要求较高。此法虽能准确定量出防霉剂效果，但反映不出防霉的长效性。
2 最低抑菌浓度（MIC）法
本法是根据防霉剂能够抑制霉菌生长的最低MIC，来判断防霉剂抑菌效果，MIC愈低，防霉效果愈佳。方法是将各种防霉剂配成浓度梯度液，加入上层带定量受试菌平板的牛津杯中，置培养箱（28±1℃）培养2～3d，由菌生长情况定出最低MIC，如要进一步精确可继续细分浓度梯度值。也可按防霉剂浓度梯度将防霉剂液直接加入培养基中（培养基的量稀释防霉剂浓度的因素要事先考虑进去），轻慢摇动，让药剂在培养基内均匀分布，当培养基凝固后，用白金耳放射状地按顺序划线接试验菌悬液（菌定量）。标号，置培养箱（28±1℃）内培养2～3d，从平板浓度由低到高的菌生长与否定出MIC值。要求进一步精确可再细分浓度梯度。
此法选防霉剂的优、缺点与杯碟法类似。
3 饲料强化防霉（破坏性）试验
本法是提高饲料水分点，恶化环境（高温、高湿），促使饲料尽快发霉，根据霉变严重程度及测霉菌数来判断防霉效果。方法是先制作好适当水分的饲料，饲料水分应均匀，且水分控制在15%～18%。水分调试过高（>20%），试验强化太大，结果会出现较大误差，水分太低，试验时间太长。
称取已制作好水分的饲料，按设计的比例添加防霉剂，搅拌均匀，加入三角瓶（用牛皮纸包扎瓶口）或塑料袋中，置培养箱（温度35～38℃，相对湿度95%以上）培养，定期检测霉菌数（GB13092-91）。
此法作为防霉剂性能评判的中期试验，试验结果较直观，在较短时期内（10～20d）即能得出防霉效果。对各种类型防霉剂的评价普遍适用。缺点是试验时间仍显较长，对防霉性能相近的防霉剂其结果不够准确。
4 饲料常规试验
本法是以正常饲料（水分11%～12.5%），在自然环境下储放，按规定的时间抽样进行霉菌检测判定其防霉效果，具体方法同饲料强化防霉试验。
此法对于各类防霉剂的期效试验说明力强，可作为防霉剂的终选试验，其最大的弊端是时间长，需2～3个月。
5 二氧化碳释放法
本法是根据饲料受霉菌作用而霉变腐烂的过程中会产生CO2，通过间接测定释放出的CO2产量来判断防霉剂效果，饲料霉变程度越重，产生CO2量越大，产生CO2量与防霉剂防霉效果成反比。方法是将调制好水分（15%～15%）的饲料称取适量（200～300g），按试验浓度加入防霉剂搅拌均匀，装三角瓶置培养箱（温度稍高）储放，5～7d后密封瓶口一昼夜聚集CO2气体，开始采用CO2测定仪或Draeqer氏气体检测器及CO2管（CH23501）测其产量，在规定时间间隔内重复测定。当CO2含量急剧增加时，则表明饲料中霉菌生长繁殖旺盛，呼吸增强，饲料开始发霉。因此产生CO2时间越迟、产量越少的试样防霉效果越佳。
此法对选择各种类型的防霉剂都可行，实用方便，缺点是很难掌握急剧释入CO2的时间，需把握临界时段。
6 温度测定法
饲料异常发热是饲料霉变的前兆。饲料发热和霉变是紧密相关的，饲料发热容易生霉，而生霉之后又往往促进发热，储料发热主要与微生物活动有关，微生物大量生长繁殖，其呼吸旺盛大，释放大量的热，促使饲料开始霉变，霉变是储料微生物活动的结果。因此测定温度指标能定性地说明防霉剂的防霉效果，一般饲料不容易传热，它的变化比环境温度变化慢，有滞后现象，并且温度变化幅度比环境温度变化小。当加入防霉剂后，测定饲料温度升高幅度在2～5℃，即可判定饲料发热，发热后1～3d内开始有霉点出现，在规定时间间隔内测定饲料温度，试样温度先跃升，且幅度大的防霉效果不佳。
