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防霉剂杀菌效力的判定及其综合评价

  作者: 来源: 日期:2006-03-14  
 

为保证饲料厂家用好优质饲料防霉剂,以减少饲料发霉,本文着重阐述了优选防霉剂的方法、优缺点和应该注意的问题,为饲料厂家科学运用防霉剂提供参考。

1  杯碟法——测定最大抑菌圈直径

  本法采用杯碟中加入一定剂量防霉剂液,在琼脂平板上扩散,根据抑菌圈直径大小来定量测定其防霉效果。方法是将一定规格的不锈钢牛津杯(1.0× 1.0cm、0.8×1.0cm),轻轻垂直置于上层带定量规定试验菌琼脂平板上,杯中加入一定剂量的被测防霉剂配制液,小心平置于培养箱(28±1℃)中培养2~3d,在菌体生长的同时,防霉剂液均匀扩散到琼脂平板上,抑制杯周围的菌孢子生长,从而产生不长菌的透明抑菌圈,抑菌圈直径越大,则表明抑菌效果越显著。操作过程中,供试菌悬液菌数应控制在106~107个/mL之间,防霉剂剂量0.8%~1.6%之间。

  常见的防霉剂,绝大多数是有机酸、有机酸盐、有机酸酯等或多种成分的复配型粉剂,经常水、油溶共存,因此在配制溶剂时,必须选配一种理想的溶剂,此溶剂既可将防霉剂水、油溶有效成分从载体上完全溶解下来,又在试验中对受试菌没有抑制作用。

  此法的特点,是它能定量比较防霉剂的抑菌效果,速度快,结果准确,但操作复杂,要求较高。此法虽能准确定量出防霉剂效果,但反映不出防霉的长效性。

2  最低抑菌浓度(MIC)法

  本法是根据防霉剂能够抑制霉菌生长的最低MIC,来判断防霉剂抑菌效果,MIC愈低,防霉效果愈佳。方法是将各种防霉剂配成浓度梯度液,加入上层带定量受试菌平板的牛津杯中,置培养箱(28±1℃)培养2~3d,由菌生长情况定出最低MIC,如要进一步精确可继续细分浓度梯度值。也可按防霉剂浓度梯度将防霉剂液直接加入培养基中(培养基的量稀释防霉剂浓度的因素要事先考虑进去),轻慢摇动,让药剂在培养基内均匀分布,当培养基凝固后,用白金耳放射状地按顺序划线接试验菌悬液(菌定量)。标号,置培养箱(28±1℃)内培养2~3d,从平板浓度由低到高的菌生长与否定出MIC值。要求进一步精确可再细分浓度梯度。

  此法选防霉剂的优、缺点与杯碟法类似。

3  饲料强化防霉(破坏性)试验

  本法是提高饲料水分点,恶化环境(高温、高湿),促使饲料尽快发霉,根据霉变严重程度及测霉菌数来判断防霉效果。方法是先制作好适当水分的饲料,饲料水分应均匀,且水分控制在15%~18%。水分调试过高(>20%),试验强化太大,结果会出现较大误差,水分太低,试验时间太长。

  称取已制作好水分的饲料,按设计的比例添加防霉剂,搅拌均匀,加入三角瓶(用牛皮纸包扎瓶口)或塑料袋中,置培养箱(温度35~38℃,相对湿度95%以上)培养,定期检测霉菌数(GB13092-91)。

  此法作为防霉剂性能评判的中期试验,试验结果较直观,在较短时期内(10~20d)即能得出防霉效果。对各种类型防霉剂的评价普遍适用。缺点是试验时间仍显较长,对防霉性能相近的防霉剂其结果不够准确。

4  饲料常规试验

  本法是以正常饲料(水分11%~12.5%),在自然环境下储放,按规定的时间抽样进行霉菌检测判定其防霉效果,具体方法同饲料强化防霉试验。

  此法对于各类防霉剂的期效试验说明力强,可作为防霉剂的终选试验,其最大的弊端是时间长,需2~3个月。

5  二氧化碳释放法

  本法是根据饲料受霉菌作用而霉变腐烂的过程中会产生CO2,通过间接测定释放出的CO2产量来判断防霉剂效果,饲料霉变程度越重,产生CO2量越大,产生CO2量与防霉剂防霉效果成反比。方法是将调制好水分(15%~15%)的饲料称取适量(200~300g),按试验浓度加入防霉剂搅拌均匀,装三角瓶置培养箱(温度稍高)储放,5~7d后密封瓶口一昼夜聚集CO2气体,开始采用CO2测定仪或Draeqer氏气体检测器及CO2管(CH23501)测其产量,在规定时间间隔内重复测定。当CO2含量急剧增加时,则表明饲料中霉菌生长繁殖旺盛,呼吸增强,饲料开始发霉。因此产生CO2时间越迟、产量越少的试样防霉效果越佳。

  此法对选择各种类型的防霉剂都可行,实用方便,缺点是很难掌握急剧释入CO2的时间,需把握临界时段。

6  温度测定法

  饲料异常发热是饲料霉变的前兆。饲料发热和霉变是紧密相关的,饲料发热容易生霉,而生霉之后又往往促进发热,储料发热主要与微生物活动有关,微生物大量生长繁殖,其呼吸旺盛大,释放大量的热,促使饲料开始霉变,霉变是储料微生物活动的结果。因此测定温度指标能定性地说明防霉剂的防霉效果,一般饲料不容易传热,它的变化比环境温度变化慢,有滞后现象,并且温度变化幅度比环境温度变化小。当加入防霉剂后,测定饲料温度升高幅度在2~5℃,即可判定饲料发热,发热后1~3d内开始有霉点出现,在规定时间间隔内测定饲料温度,试样温度先跃升,且幅度大的防霉效果不佳。

 
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