丹麦的第一个猪生殖与呼吸综合症(PRRS)病例诊断于1992年,本病主要见于丹麦西部,但也散布到该国其它地区,在1996年二月到六月间全国性的血清学调查发现肉猪群的感染率约为33%;欧洲的PRRS病毒株(简称为欧洲株)包括丹麦野外分离株(简称为丹麦株)在内彼此间都很相近,但与美洲株差异大。为了防止或至少降低PRRS在丹麦的扩散,「丹麦猪生产与屠宰场联盟」志愿试行「PRRS控制计画」,此一计画的作法是以Ingelvac PRRS活毒(美洲株)疫苗免疫已感染过PRRS的猪群,之后再检测所有猪只的PRRS抗体,此一疫苗直到1996年七月一日才被丹麦卫生单位核准上市,且只许使用于3到18周龄的猪。
在丹麦官方特许之下,于1995年十月底进入人工授精中心的所有公猪,至少八周前在检疫隔离舍期间都曾接受此一疫苗免疫;为了解这些人工授精中心精液推广后的影响,1996年七月至八月,乃透过采血检验及聚合脢链反应技术进行调查,结果首先在以前未曾免疫过的猪群检测到类似PRRS的病毒,接着发现由血液样品分离到的PRRS病毒其基因序列与疫苗病毒株(简称为疫苗株)有超过99%的相似性,因此证实疫苗病毒会经由人工授精中心公猪的精液散播到过去没有PRRS的猪群。
1996年七月疫苗准许使用之后,立即在1,100个PRRS阳性,且年龄层合于规定的猪群内使用,其中 900个为一贯场或供应仔猪的猪场,场内除了可以免疫的猪群外还有不可免疫的种猪,这些猪群当时都无PRRS的临床症状,母猪及保育猪的血清学反应也显示并没有病毒在猪群内循环。从七月底开始,在同一猪群采血检验,由这些代表母猪、新女猪、保育猪、生长猪及肥育猪的血样中80%都可测到抗疫苗株的抗体;接下来两、三个月进行更大规模的疫苗株抗体筛检,发现14个未曾注射疫苗、过去抗体反应阴性的猪场,对疫苗株反应变成阳性;自1996年11月到1997年3月,又有132个以前PRRS阴性、未曾使用疫苗的猪群确定被疫苗株所感染。从1996年十月到1997年五月间,试行「PRRS控制计画」的猪场中约550场出现包括流、死产数目及保育猪死亡率上升的急性PRRS症状,这些问题都发生于猪群内免疫前没有临床症状,而且PRRS抗体力价极低的母猪;发生流产的胎儿、死亡小猪的胸水、肺脏送到检验室求证是否受到PRRS感染,以细胞培养再加上可以分辨PRRS病毒欧洲株、美洲/疫苗株的多种单株抗体做区别诊断,结果在其中114个猪群样品分离到PRRS的疫苗株病毒,这个发现指出疫苗株会散播到未免疫的母猪,再藉由胎盘感染胎儿。
另外,猪免疫PRRS活毒疫苗前、后于同场选取特定母猪采样检测它们对 PRRS疫苗株及丹麦株的抗体力价,发现当3至18周龄猪免疫后,同场母猪这两种抗体力价全部上升,此一现象的原因可能是免疫动物把疫苗株传播给未免疫的母猪,使这些过去曾感染PRRS的动物有如被丹麦株所「补强」,或使得「持续感染」的丹麦株再度活化所致,在这些病例的胎儿、死产或衰弱仔猪病材都分离到美洲型的疫苗株病毒。
综合以上结果推测造成疫情的病毒可能传播路径有三:引进免疫的动物、使用曾免疫的人工授精公猪精液及空气传播。从临床症状、病毒分离、核酸序列比对都指出免疫后造成丹麦母猪群发生似PRRS症状的病原是源于美洲株的PRRS疫苗病毒;但进一步应再以分离出来的「类似疫苗病毒株」人工接种怀孕母猪,才能完全确定此一疫苗株是否扮演病原的角色。由以上试用PRRS活毒疫苗的初步观察报告可以结论:不论研发或试用活毒疫苗都必需非常小心,否则驯化的病毒其毒力若在野外恢复,造成的困扰将不易收拾。