蛋氨酸螯合物简易测定方法

　　金属微量元素氨基酸螯合物，因其具有较高的生物价值，并能增强畜禽的免疫功能、提高动物抗应激能力，遂已成为一种新型的饲料添加剂，现被广泛地应用于饲料生产中。但由于检测微量元素氨基酸螯合物需大型仪器设备，一般的中小型饲料厂均不具备检测能力，这使产品质量得不到有效控制，研究一种既简便又实用的检测方法就成了一项迫在眉睫的任务，这里采用定性与定量相结合的方法基本解决了蛋氨酸螯合物的检测问题。

　　1　定性
　　用甲醇浸提待测螯合物样品，过滤得滤液，滴加双硫腙试剂液，如系纯螯合物或金属微量元素离子极微，则溶液显绿色。螯合物混有无机盐时，随无极盐组分加大显色由绿色向红色过渡。

　　2　定量
　　2.1　蛋氨酸含量测定
　　2.1.1　试剂
　　磷酸氢二钾溶液：500g/L；磷酸二氢钾溶液：200g/L；碘化钾溶液：200g/L；碘溶液：约0.1mol/L；硫代硫酸钠标准滴定液：约0.1mol/L；淀粉溶液：10g/L；盐酸溶液：1＋3。

　　2.1.2　分析步骤
　　准确称取试样0.2～0.3g(精确至0.0001g)于碘量瓶中，加2mL稀盐酸(1＋3)，加热溶解，加入70mL去离子水，然后分别加入下列试剂：15mL磷酸二氢钾溶液，15mL磷酸氢二钾溶液(调节pH至7.0)，15mL碘化钾溶液，充分摇匀，加入25mL碘溶液，盖上瓶盖，水封，于暗处放置30分钟，用硫代硫酸钠标准溶液滴定过量的碘，近终点时加入1mL淀粉指示剂，继续滴定至无色并保持30秒为终点，同时做空白试验，测定结果见表1。
　　　　　　　表1蛋氨酸含量测定(％)
　　
　　注：t=1.13；t_0.05,8=2.31。

　　2.1.3　计算公式
　　X(％)=C(V0－V)×0.0746×100/M
　　式中：
　　C-为硫代硫酸钠标液的浓度，mol/L；V-滴定试样时消耗的硫代硫酸钠标液的体积，mL；
　　V0-滴定空白时消耗的硫代硫酸钠标液的体积，mL；
　　M-试样质量，g；
　　0.0746-与1mL硫代硫酸钠标液相当的以g表示的DL－蛋氨酸的含量。

　2.2　金属微量元素的测定
　　以锌为例，其它微量元素可参照不同元素的测定方法测定。

　　2.2.1　试剂
　　乙酸溶液：1＋16；六次甲基四胺：20％(m/V)溶液；二甲酚橙指示剂：0.2％(m/V)溶液；EDTA标准滴定液：约0.05moL/L。

　　2.2.2　测定步骤
　　准确称取1g样品(精确至0.0001g)，置于烧杯中加入1＋16的乙酸10mL，并于电炉上微沸，然后转入100mL容量瓶中，定容。准确吸取样品液25mL于250mL三角瓶中，加入15mL水及2滴二甲酚橙指示剂，然后滴加六次甲基四胺至溶液呈稳定的紫红色后再过量5mL，用EDTA标准液滴定至溶液由紫红色变为亮黄色即为终点，测定结果见表2。
　　　　　　　　　　　表2锌含量测定(％)
　　　
　　　注 ： t=0.47； t_0.05,8=2.31。

　　2.2.3　计算公式

　　式中：C-EDTA标液的浓度，mol/L；V-样品所耗标液的体积，mL；M-试样质量，g；0.06537-每毫摩尔锌的克数。

　　3　结论
　　a.从试验结果看出，t<t0.05,8不存在显著性差异，完全可以用常规法代替仪器法来测定蛋氨酸螯合物。
　　b.应用本方法测定时必须先做定性试验，如果双硫腙显色呈红色，则该产品属劣质或假冒产品，不适合做定量分析。

　　[参考文献]
　　[1]韩友文.微量元素氨基酸螯合物的生物效价及其应用中的一些问题(续).饲料博览，2001(12)：11－14.
　　[2]邵建华，陆腾甲.复合氨基酸微量元素螯合物饲料添加剂的应用与开发.饲料工业，2000(5)：40－44.
　　[3]孙郁柱，王静，王世平.氨基酸微量元素螯合物饲料添加剂的应用与开发.饲料博览，2000(7)：39－40.